Dental pulp fibroblast and sex determination in controlled burial conditions / Fibroblastos de la pulpa dental y la determinación del sexo en condiciones controladas de enterramiento

The need to identify bodies that are found as a result of disappearances with a diversity of causes, illegal burials and massive disasters, represent a wide percentage of dentistry practice on forensic research. The following study determined the performance of Barr Body Test, in fibroblasts of healthy teeth, under different conditions of burial (in vitro) with variations in pH, humidity and salinity in terms of general accuracy and sensitivity for men and women. Analyzed sample considered 47 dental pulps, taken from teeth under burial conditions during a period of a month. From dental pulps samples, 265 histological cuts valid for this study, were obtained, which were observed with an optical microscope under conventional H/E staining. Results showed a 98.9% of well-diagnosed cases, which correspond to the overall accuracy of the method. Sensitivity for men was 97.5% and 100% for women, over the analyzed sample. In low humidity conditions, 3 samples of badly diagnosed cases in men were observed, with a group accuracy of a 90%, with a sensitivity of 25% for men and 100% for women. The present study establishes that based on these results, the performance of Barr Body Test in fibroblasts, proposed for healthy pulp teeth, is not affected by burial conditions in terms of pH (acid-alkaline), salinity (high-low) and high humidity.

La necesidad de identificar cuerpos que resultan como consecuencia de desapariciones de causas variadas, inhumaciones ilegales y desastres masivos representa un porcentaje amplio en el quehacer odontológico en un escenario de investigación forense. El presente estudio determinó el rendimiento de la prueba diagnóstica de observación del cuerpo de Barr en células de la pulpa de dientes sanos, sometidos a distintas condiciones de enterramiento (in vitro) con variación de pH, humedad y salinidad en términos de exactitud general y sensibilidad para hombres y mujeres. La muestra analizada consideró 47 pulpas dentales, extraídas de dientes sometidos a condiciones de enterramiento durante un mes. De las pulpas dentarias se obtuvieron 265 cortes histológicos válidos para el estudio, los cuales mediante la tinción convencional H/E, fueron observados al microscopio óptico. Los resultados arrojaron un 98,9% de casos bien diagnosticados, que correspondió a la exactitud general del método. La sensibilidad para hombres fue de 97,5% y para mujeres de 100% sobre el total de la muestra analizada. Las condiciones de pH (ácido y alcalino), salinidad (alta y baja) y alta humedad presentaron una exactitud de grupo de 100%, con una sensibilidad para hombres y mujeres de 100%. En la condición de baja humedad se observaron 3 muestras de hombres mal diagnosticadas con una exactitud de grupo de 90% y sensibilidad para hombres de 25% y para mujeres de 100%. A la luz de los resultados, el presente estudio establece que el rendimiento de la prueba diagnóstica de observación del cuerpo de Barr en fibroblastos, propuesto para pulpas de dientes sanos, no se afecta con las condiciones de enterramiento propuestas bajo pH ácido ­ alcalino, salinidad alta ­ baja y humedad alta.

Observation of sex chromatin in exhumed bones, evaluation of their diagnosis value / Observación de la cromatina sexual en osamentas exhumadas, evaluación de su valor diagnóstico

Observation of sexual chromatin has shown to be very helpful in gender forensic diagnosis. In the present study we analyzed the diagnosis performance of the method in, non-treated or treated with conventional bone techniques, exhumed bone pieces. We used long bones of male and female individuals, the method applied is described in Suazo et al. (2010). In the non-treated exhumed pieces, the general accuracy of the method was 75 percent, while in the treated pieces the method was inapplicable due to the lack of cells in the tissue. Our results suggest that it is possible to determine the sex of aged human bones buried under different conditions through a fast and simple histological method, but the treatment with physical and chemical means eliminates the remaining cells in the bone tissue.

La observación de la cromatina sexual ha demostrado ser útil en el diagnóstico forense del sexo. En este estudio analizamos el rendimiento diagnóstico del método en piezas óseas exhumadas no tratadas y tratadas mediante osteotécnica convencional. Utilizamos muestras de huesos largos de individuos de sexo masculino y femenino, el método se aplicó de acuerdo a lo descrito por Suazo et al., (2010). En las piezas exhumadas no tratadas la exactitud general del método fue del 75 por ciento, mientras que en las piezas tratadas el método resultó inaplicable, debido a la ausencia de células en el tejido. Nuestros resultados sugieren que es posible determinar el sexo en osamentas humanas exhumadas de larga data y en diferentes condiciones de enterramiento, mediante un método histológico rápido y sencillo, pero que el tratamiento por medios físicos y químicos elimina las células remanentes en el tejido óseo.

Use of hair root sheath for barr body determination.

Determination of sex is useful in Forensic Medicine. Barr bodies can be seen hair root sheath cells. The presence of barr bodies indicates that sex of the person is female. They are inactive X chromosome. The Barr bodies are also known as sex chromatin. Hair can present in the crime scene. Hair is trace evidence. The stain used was aceto-orcein. The percentage of barr bodies was found to be 28-49 %. The study was carried out for eight months and it was found that barr bodies persisted for eight months. It can be present anywhere at the crime scene. Hair of the accused can be present in hands of victim due to cadaveric spasm. Hair of victim can be found on the clothes of the accused. There is average fall in percentage of barr bodies with the passage of time due to the start of decomposition changes in the root sheath cells.

Sex determination by observation of barr body in teeth subjected to high temperatures / Determinación del sexo mediante la observación de la cromatina de barr en piezas sometidas a altas temperaturas

Sex determination is one of the keys in the identification process. A useful histological method for sex determination is the observation of Barr chromatin or Barr body. This study determines the effect of high temperatures on the diagnostic performance of the Barr chromatin observation on teeth. Were used 50 healthy teeth from 25 male and 25 female individuals aged between 14 and 44 years. The teeth were divided into 5 groups (each group with 5 female and 5 male teeth) and were exposed to controlled temperatures of 200, 400, 600, 800, and 1000 degrees C for 5 minutes. The coronal pulp was obtained and the tissue was processed and stained with hematoxylin-eosin. Four histological slides of male and 4 of female individuals were randomly selected, for each temperature level, which were observed by conventional microscopy at 100X magnification, each showing 50 cells per plate. The presence of 1 cell with visible sex chromatin was considered positive for females. It was only possible to evaluate the samples from groups subjected to 200 and 400 degrees C. In the groups analyzed, the test showed 100 percent accuracy. The average number of cells found to be positive Barr chromatin was 15 (SD 3.9) at 200 degrees C and 11 (SD 2.8) at 400 degrees C. Hence, it was possible to detect the sex at these temperatures by observing chromatin of the Barr body in dental pulp.

La determinación del sexo es uno de los pilares del proceso de identificación, Un método histológico útil para la determinación del sexo es la observación de cromatina de Barr. El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de altas temperaturas sobre el rendimiento diagnóstico de observación de cromatina de Barr en piezas dentarias. Se utilizaron 50 piezas dentarias sanas, 25 de individuos de sexo masculino y 25 de sexo femenino con edades comprendidas entre los 14 y 44 años. Las piezas dentarias fueron divididas en 5 grupos, (cada grupo con 5 piezas de sexo femenino y 5 de sexo masculino) y fueron expuestas a temperaturas controladas de 200°C, 400°C, 600°C, 800°C y 1000°C por 5 minutos. La pulpa coronaria fue obtenida y el tejido fue procesado para H-E. Se seleccionaron aleatoriamente 4 placas histológicas de individuos de sexo masculino y 4 de sexo femenino, por cada nivel de temperatura, las cuales fueron observadas por microscopía convencional a un aumento de 100X, observándose 50 células por placa. La presencia de 1 célula con cromatina sexual visible se consideró positiva para el sexo femenino. Sólo fue posible evaluar las muestras provenientes de los grupos sometidos a 200°C y 400°C. En los grupos analizados la prueba presentó un 100 por ciento de exactitud. El número medio de células Barr positivas encontradas fue de 15 (DS 3,9) a 200°C y 11 (DS 2,8) a 400°C, por lo que a estas temperaturas fue posible el diagnóstico del sexo mediante la observación de la cromatina sexual en pulpa dental.

Sex chromatin in dental pulp: performance of diagnosis test and gold atandard generation / Cromatina sexual en pulpa dental: rendimiento de la prueba diagnóstica y generación del gold standard

The sex chromatin or Barr body is a condensation of chromatin present at the nucleus of cells in female individuals. Their observation is possible in different cell types and is used for the rapid diagnosis of biological sex. The observation of this condensation in cells of the pulp tissue can be useful in the forensic diagnosis of sex, primarily because of the protection it give dental hard tissues, but its diagnostic value has not been tested. The purpose of this study is to analyze the diagnostic value of the observation of sex chromatin in cells of the pulp tissue. We used 40 premolars and third molars 20 from men with a mean age of 20.6 years (SD 8.8) and 20 from women with a mean age of 20.4 years (SD 7.4). The pulp was obtained from teeth extracted and localized 50 cells per plate. The presence of a cell with visible Barr body was considered positive for women. With these results, we evaluated the diagnostic performance of the test. The performance of the test was 100 percent; of the 50 cells observed per plate, mean Barr bodies positive cells was 20.4 (SD 0.44) in female samples. There was no positive cell in preparations of male subjects. The diagnostic test observation of sex chromatin in dental pulp is a reliable test for sex determination. This study provides a gold standard for performance assessment in which the teeth have suffered extreme physical conditions, such as incineration and dumping.

La cromatina sexual o de Barr es una condensación de cromatina presente a nivel del núcleo de las células de individuos de sexo femenino. Su observación es posible en diversos tipos celulares y es utilizado para el diagnóstico rápido del sexo biológico. La observación de esta condensación en células del tejido pulpar puede ser útil en el diagnóstico forense del sexo, principalmente debido a la protección que los tejidos duros dentarios le otorgan, sin embargo su valor diagnóstico no ha sido analizado. El propósito de este estudio es analizar el valor diagnóstico de la observación de la cromatina sexual en células del tejido pulpar. Se utilizaron 40 premolares y terceros molares maxilares, 20 de hombres con una media de edad de 20,6 años (DS 8,8) y 20 de mujeres con una edad media de 20,4 años (DS 7,4). La pulpa fue obtenida a partir de piezas extraídas, se realizó la extirpación pulpar y el tejido fue procesado para H-E. Se seleccionaron aleatoriamente 4 placas histológicas, las cuales fueron observadas de manera sistemática utilizando una microscopia Olimpus CX21 con aumento 100X, localizándose 50 células por placa. La presencia de 1 célula con cromatina sexual visible se consideró positivo para sexo femenino. Con estos resultados se evaluó el rendimiento diagnóstico de la prueba. El rendimiento de la prueba fue del 100 por ciento, de las 50 células observadas por placa, la media de células cromatina sexual positiva fue de 20,4 (DS 0,44) en muestras de sexo femenino. No se observó ninguna célula positiva en preparaciones de sujetos de sexo masculino. La prueba diagnóstica observación de la cromatina sexual en pulpa dentaria es una prueba confiable para la determinación del sexo. Este estudio establece un gold estándar para la evaluación del rendimiento en los que las piezas dentarias han sufrido de condiciones físicas extremas como incineración, inmersión, etc.

Study on koilocytosis, X-chromatin and HSV-2 in cervical smears in Nepal.

A total of 1,106 cervical smears were studied during a one year period from Feb 1999 to Feb 2000. Majority of the lesions were Inflammatory smears constituting 91.0%, Cervical intraepithelial neoplasia [CIN] and Squamous cell carcinoma [SCC] cervix constituted 8.0% and 1.0% respectively. The percentage of different grades of CIN being CIN I 85.0%, CIN II 9.0% and CIN III 6.0%. Thirty cases were taken as a study group. The commonest age group for CIN was 31-40 years 80.0% and for carcinoma cervix above 50 years 63.0%. The most common risk factors were marriage before 20 years of age 80.0% and a low socio-economic status 70.0%. The common presenting feature in CIN was pain lower abdomen 88.0%, followed by whitish discharge per vagina 60.0%. Similarly in carcinoma cervix pain lower abdomen 80.0% followed by weight loss 60.0% were the common presenting symptoms. Koilocytic change was seen in 42.1% of the cases of CIN I. The incidence of X-chromatin positivity gradually decreased as the lesion advanced, the p-value between CIN I and CIN II [p=<0.02], CIN I and CIN III [0=0.00] and between CIN III and Carcinoma cervix [p=<0.004] being significant. An association with Herpes simplex virus-2 [HSV-2] was seen in 11.0% cases of CIN I, 33.0% cases of CIN IIl and 40.0% cases of carcinoma cervix with a gradual rising antibody titre of 1:2 in CIN I, 1:7 in CIN III and 1:7 to 1:9 in carcinoma cervix respectively.

Role of Barr bodies obtained from oral smears in the determination of sex.

Barr body is an inactivated X chromosome in the normal female somatic cell. Inactivation of these chromosomes is known as Lyonization. Lyonization has both genetic and clinical significance. Barr body can be easily identified with ordinary stains. It also helps in identifying the sex of an individual when used judiciously. A review is made on the lyonization of Barr body and its utility in sex determination.

Study of primary amenorrhoea with special reference to cytogenetic evaluation.

An attempt has been made to find out the proportion of genetic causes in cases of primary amenorrhoea and to analyse different chromosomal pattern. Cases were analysed according to clinical profile, X-ray, laparoscopy/pneumography, hormone profile, USG, Gonadal Biopsy and Cytogenetic study including Sex Chromatin (Barr body) and Karyotyping. Among the 72 cases studied, the aetiological factors were Mullerian duct abnormalities in 27 cases (37.5%) Gonadal agenesis in 13 cases (18.05%). Turner stigmata in 18 cases (25%), Y cell line in 6 cases (8.33%). Delayed menarche in 4 cases (5.55%), systemic disease like Tuberculosis and Idiopathic 2 cases (2.77%) each. Chromosomal aberration was seen in 24 cases (33.33%) and it comes second most common cause of primary amenorrhoea after mullerian duct abnormalities.

Disgenesia gonadal mixta: ambigüedad genital. Urgencias y problemas diagnósticos / Mixed gonadal dysgenesia: genital ambigüity. Emergency and diagnostic problems

Presentamos un caso de Disgenesia Gonadal Mixta que anátomicamente presenta: ambigüedad de genitales externos con seno urogenital al que desemboca vagina, útero y trompas normales. La gónada derecha corresponde a testículo con extensas áreas de fibrosis y la izquierda a una gónada disgenética. La cromatina sexual fue positiva, también lo fue el Test de Hibridación in situ para la región centromérica de Cromosoma Y. El cariotipo determinó un mosaicismo 45 X (41 por ciento de las metafases estudiadas) / 46 X + marc (?Y). Se decidió la extirpación quirúrgica de ambas gónadas.

Determinación de la variabilidad en la condensación de la cromatina espermática y alfa-glucosidasa seminal con relación al espermiograma / Chromatin condensation and seminal alpha glucosidase variability and their relationship to spermiogram

Background: Sperm functional tests as an addition to semen analysis have been used to study the fertilization ability of spermatozoa. Besides the usual variability of the seminal analysis an individual variability in the results of functional tests has been recently found. Aim: to evaluate in a three months period, the individual variability of sperm parameters and sperm maturation using the chromatin condensation test and epidydime a-glucosidase (that allows to discriminate obstructive processes). Material and method: The evaluation was carried out in two donors (12 samples) apparently in good health. One of them presented evident semen analysis alterations (donor 1) and the other was considered normal under the WHO standards (donor 2). Results: The averages for donor 1 were: Sperm count 24x106 sperm/ml (range 10-58x106 sperm/ml), morphology 31.8 percent (range 30-35 percent), total motility 33 percent (range 20-42 percent), sperm maturation 38 percent (range 28-78 percent), a-glucosidase 8.65 (U/ml (range 5-10 (U/ml). The averages for donor 2 were: Sperm count 96x106 sperm/ml (range 50-140x106 sperm/ml), morphology 32.2 percent (range 30-35 percent), total motility 69 percent (range 58-78 percent), sperm maturation 17 percent (range 7-30 percent), a-glucosidase 36.9 (U/ml (range 20-82 (U/ml). Conclusions: These results show that significant variations can be found in the sperm parameters and in seminal plasma a-glucosidase; however these variations are generally maintained at the normal or abnormal ranges for each individual, except the sperm morphology that was constant and with low variation in both donors. The determination of the chromatin condensation in the semen analysis gives an additional information about the grade of sperm maturation and would be of great value for differentiating between sperm samples that show similar morphology values

Sertoli Cell Adenomas in Complete Testicular Feminization Syndrome / 대한산부인과학회잡지

Testicular feminization is an uncommon genetic disorder with considerably familial predisposition and results in total feminization due to end-organ unresponsiveness to androgens. It is characterized by the presence of testes in phenotypically female with adequate breast development, normal extemal genitalia, absence of mullerian structures, and meager or absence of body hair. These patients characteristically have male karyotype(XY) and negative sex chromatin and are at increased risk of undergoing malignant transformation of the undescended gonad. In recent times, the malignant potential of the dysgenetic gonads in the intersex patients with a Y chromosome has been stressed by many authors, but few reports of an association between testicular feminization syndrome and benign tumors such as Sertoli cell adenomas. In the present study, postoperative pathology revealed that the gonads were Sertoli cell adenomas. The main features of clinical presentation and histological studies are briefly discussed with a review of the literature.

Pseudohermafroditismo masculino: experiência do Setor de Endocrinologia Ginecológica da UFPR / Pseudohermaphroditism: experience Gynecology-Endocrinology's sector of UFPR

OBJETIVOS: Análise de pacientes com pseudohermafroditismo masculino com objetivo de avaliar as formas de apresentaçäo, diagnóstico, manejo clínico e cirúrgico. CASUíSTICA E MÉTODOS: Foram avaliadas retrospectrivamente 43 pacientes do Setor de Endocrinologia Ginecológica do Departamento de Toxoginecologia da UFPR de 1970 a 1996, 35 tinham idade entre 11 a 31 anos (81,4 por cento). RESULTADOS: O principal motivo para consulta ginecológica foi ausência de menstruaçäo em 24 pacientes (55,8 por cento). O exame complementar mais utilizado para diagnóstico foi cromatina sexual em 36 pacientes (83,7 por cento). Classificaram-se 18 casos (41,8 por cento) como forma completa da síndrome da insensibilidade androgênica e 25 casos (58,2 por cento) como outras formas. A cirurgia mais frequente nas outras formas para adequaçäo sexual feminina foi clitoridectomia em 9 casos (56,2 por cento) e para adequaçäo sexual ao sexo masculino foi ortofaloplasia em 5 (55,5 por cento). neovagina foi realizada em 4 casos (22,2 por cento) na forma completa. A maior parte das pacientes foi seguida com terapia de reposiçäo hormonal (65,2 por cento).

Estudio de cromatina X y Y en pacientes epilépticos / X and Y chromatin study in epileptic patients

Algunos autores han informado que las alteraciones en el número de cromosomas sexuales son más frecuentes en pacientes epilépticos. En este trabajo se estudió la cromatina X y Y en una población de pacientes epilépticos con objeto de detectar alteraciones en el número de cromosomas sexuales en ellos. Se estudiaron 608 hombres y 537 mujeres mediante la cromatina X, no encontrándose ninguna alteración en esta prueba. En 279 hombres se determinó la cromatina Y en la cual tampoco se encontraron anormalidades

Estudio de correlación entre retardo mental y características de la cromatina sexual en pacientes del Centro de Educación Especial San Juan de Dios Arequipa 1996

1. Se hizo la revisión de 60 historias clínico - pedagógica que pertenecen al 100 por ciento de alumnos del Centro Educativo especial San Juan de Dios de Arequipa, correspondiente al año lectivo 1996 quienes son portadores de retardo mental y asisten regularmente al Centro Educativo. 2. Al 100 por ciento de alumnos se les tomó una muestra de células de la mucosa oral, mediante raspado del carrillo de la boca, extendiendose en la lámina portaobjeto, para estudio citológico y determinar las caracteristicas de su cromatina sexual. 3. Se encontró que el 38.34 por ciento son mujeres y el 61.66 por ciento son varones cuyas edades estan entre 10 a 34 años predominando el grupo comprendido entre los 15 a 24 años con el 74.98 por ciento; son los varones jovenes los que más asisten a este centro. 4. Considerando el estado civil de los padres de niños y adolescentes de este Centro Educativo, son casados y viven juntos en un 71.66 por ciento, lo que significa que asumen con responsabilidad, la formación de sus hijos, solo en el 6.6 por ciento los padres son solteros (as). 5. Predominan los casos de retardo mental moderado con un 80 por ciento y en retardo mental leve existe el 18.33 por ciento, lo que corrobora que es el nivel de retardo mental moderado que permite entrenamiento en ocupaciones manuales útiles que se imparten en el Centro Educativo como costura, bordado, evanisteria, carpinteria, zapateria, servicios múltiples, etc. 6. En el grupo mujeres hay cuatro casos (6.67 por ciento) presentan menos de cromatina sexual considerandolas como portadoras del síndrome de Turner; y 13 casos 21.66 por ciento con cromatina sexual menor del 25por ciento considerandolas como portadoras del sindrome del mosaisismo. El retardo mental en mujeres esta relacionada con cromatina sexual positiva es decir portadoras de algún sindrome cromosomial. 7. En el grupo hombre con retardo mental no está intimamente relacionada con la cromatina sexual en este trabajo. 8. A los niños catalogados con retardo mental se debe considerar necesariamente el examen de las características de la cromatina sexual, para relacionar se esta asociado algún síndrome cromosomial.

Laparoscopía en niños en testículos no palpables: comunicación preliminar / Laparoscopy in children in nonpalpable testis: preliminar report

Desde comienzos de 1993 a octubre de 1994 se han efectuado 5 laparoscopías en niños con diagnóstico de testículos no palpables.Cuatro eran bilaterales y uno unilateral. Las edades fluctuaron entre 5 y 10 años. El procedimiento fue bien tolerado, sin complicaciones y en todos los casos permitió la ubicación exacta de los testículos

Correlation between Barr bodies and neutrophil drumsticks.

There is a marked difference between the frequencies of neutrophil nuclear drumsticks and mucosal cell Barr bodies in any given woman despite the fact that both represent an inactivated X chromosome. We present results of a prospective study carried out on 100 normal Saudi females to assess the statistical correlation between these two variables. We conclude that each is independent of the other. The lack of statistical correlation perhaps relates to maturational and nuclear configuration factors.

Síndrome de Turner 45,XO asociado con una inversión pericéntrica del cromosoma 13 / Turner's syndrome 45, XO associated with a pericentric inversion of chromosome 13

El propósito del presente trabajo es el de describir a una paciente con manifestaciones clínicas del síndrome de Turner, quien al realizarle los estudios cromosómicos en cultivo de linfocitos de sangre periférica, y con técnicas de bandas G, mostró un complemento cromosómico de 45, XO y además una inversión pericéntrica del cromosoma 13 con sus puntos de ruptura en las bandas pll y ql4. Los padres y el hermano de la propósita presentaron un cariotipo normal. Se discuten los mecanismos probables de origen de ambas anomalías y los pocos casos reportados en la literatura